Sequence

Rat hepatocytes

Mouse Brown Adipocytes

3T3-L1

Site  -5  -4  -3  -2  -1  0  +1  +2  +3  +4  +5

None [4]

Ins [3]

AICAR [3]

cAMP [3]

Iso   [1]

None [2]

Ins [1]

Fors [1]

CL     [1]

None [1]

Ins [1]

cAMP [1]

di8   [1]

T46    T    F    W   Y    A   T   R     P      K   A      L

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S58     P   P    C   D   L   S   M     Q     S   V       E

x

xx

x

x(x)

(x)

 

 

 

 

 

 

 

 

S61     D   L    S   M   Q   S  V     E       V   T      G

xx

 

 

(x)

(x)

 

 

 

 

 

 

 

 

T65     Q   S    V   E   V   T   G     T       T   E      G

 

 

 

 

(x)

 

 

 

 

 

 

 

 

Y119   K   P     N   Q  P   Y   E     W     I   S      Y

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

x

 

S123   P   Y     E   W   I   S   Y     K     Q   V      A

 

 

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

T219   V   E     N   K   L   T   P     C     L    K       I

 

x

x

x

 

 

 

 

 

x

 

 

 

S230   I   V     I    M   D   S  Y     D      N   D       L

x

 

x

x

 

 

 

 

 

x

 

 

 

Y231   V   I     M   D   S   Y   D     N     D   L       V

x

 

x

 

 

 

 

 

 

x

 

 

 

T261   G   R     V   N   R  T    K    P       K   P      P

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

x

 

T281   F   T     S   G   T  T     G     N     P   K      G

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

T290   K    G   A   M   V   T    H    Q     N   I       M

x

 

 

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S299  I     M    N  D    C   S   G   F       I   K       A

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

T384   F    G    Q   A  N   T    S     V     K   R      W

 

 

 

(x)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S385   G   Q    A   N   T  S    V     K     R   W      L

 

 

 

(x)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

T434   V    R     L  M   I   T    G     A     A    P      V

 

 

xx

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S440   G   A     A   P   V S     A     T     V     L      T

 

 

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

T442   A    P    V   S   A   T   V     L       T   F       L

 

 

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

T445   S   A     T   V   L   T    F    L       R   A      A

 

 

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

T527   K    D    P   A   R   T   A    E       AL D       K

 

x

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 
x, Identified phosphorylations. Each “x” indicates that the modification was identified and multiple “x’s” indicate that the modification was identified by the corresponding number of replicates. For example, “xx” indicates that the modification was identified in 2 replicates.
[ ] Number of replicates.
( ) Ambiguous site (i.e. S58 or S61).
Abbreviations: Ins, insulin; AICAR, 5-aminoimidazole-4-carboxamide riboside; cAMP, dibutyryl-cyclic adenosine monophosphate; Iso, isoproterenol; Fors, forskolin;
CL, CL-316243; di8,1,2-dioctanoyl-sn-glycerol
Note: ACSL1 was immunopurified from samples using RIPA buffer. Some of the untreated liver and brown adipocyte immunopurifications were done with gentle lysis buffer.
Table 3: Phosphorylation sites found in overexpressed ACSL1. Ad-Acsl1-Flag was overexpressed in rat hepatocytes, mouse brown adipocytes, or 3T3-L1 adipocytes, and treated as indicated.